沒有pcr儀如何逆轉

各位看官你們好，我是你們的百科小助手紙條君

上期我們說到PCR的起源以及什麼是PCR，本期就讓我為大家來繼續解讀關於PCR在生命科學領域中的廣泛應用。

在基礎科研領域的應用

最為突出的就是基因克隆領域的應用

① cDNA RDA即cDNA代表性差示分析技術，可用於高等動植物與發育相關以及其他差別表達的未知基因編碼序列的克隆，是一種分離差異表達基因的方法，比如在水稻耐鹽基因的cDNA片段克隆上等研究領域，都是非常有利的科學技術。

②RT-PCR即逆轉錄PCR法，其原理就是透過對於mRNA的逆轉錄產生DNA鏈作為模板進行常規的PCR擴增，由於其良好的放大作用以及很高的靈敏度，對於高等動植物基因表達水平以及PCR測序及探針的製備都有很好的應用。

③single-sided PCR即單側（錨式）PCR，它可以適用於獲得基因的全長序列，理論上只需要一條特異性引物GSP，在我們的研發過程中是一種可選的實驗方案。

④DD-PCR即mRNA差別顯示PCR或者叫差別顯示反轉錄PCR技術，是在mRNA差減雜交和扣除雜交技術上更進一步的創新，雖然依舊有許多不足，比如假陽性高，成本大，工作量大等，但是卻為之後更好的分離技術提供了更進一步的平臺。

⑤SSH即（抑制性消減雜交技術），是在DD-PCR和cDNA-RDA技術上又一新型表型克隆技術，相比如之前的減數PCR上，其具有很突出的優點，它使得低丰度差異表達mRNA目的序列得到了均等化和富集，提高了靈敏度，減少了假陽性。

在檢驗醫學領域的應用

1。在感染性疾病上的應用

①定性檢測——病原學確診診斷

可以用於各種感染性疾病病原學診斷，如臨床上不易分離培養，生長緩慢，或者不能培養的，亦或是血清學檢測中低濃度乙肝丙肝患者靈敏度低等的問題，都可以透過定性PCR去檢測以及輔助確診。

②定量檢測——病情的監測，療效觀察以及預後評估

免疫學檢測具有一定的靈敏度以及特異性，但是它不能定量，在確定病毒載量以及抗病毒治療監測等方面PCR定量有難以替代的應用價值。

③基因檢測——病原體耐藥性判斷

感染性疾病在藥物治療階段容易出現耐藥現象，主要是基因變異引起的，需要依賴核酸檢測來提供直接證據。如耐藥結核桿菌TB的檢測，以PCR為基礎的DNA序列測定以及基因晶片法能夠快速有效的監測TB耐藥突變情況。

④病原體基因分型以及同源性比較

應用PCR擴增以及SNP基因多型性分析，可以在病原體分佈，分類，流行病學調查等方面都有較高的應用價值。

2。在遺傳病學上的應用

基因診斷在遺傳病學上的應用，大致包括對於遺傳病患者的直接檢出，遺傳病基因攜帶者的檢出，有遺傳病家族史胎兒產前診斷等方面，都有較高的應用價值。

3。在腫瘤中的應用

腫瘤本身是細胞水平的疾病，但是歸根結底是遺傳物質變異引導下的疾病，PCR作為分子診斷方面的技術，其核酸檢測有效性的應用，使其可以在更深一層的方面去檢測病情的發生，因此，PCR技術在腫瘤方面的發展前景還是非常廣闊的。

呼，怎麼樣各位看官，看完PCR的應用，是不是發現其實他離咱們的日常生活其實是並沒有想象中那般遙遠，用到它的地方時時刻刻都有，那麼關於PCR這一陌生的技術你是否有了一定的瞭解呢？

本期的PCR那點事就先到這裡啦，下期呢，我會為各位看官去分享我在PCR生活期間的那些趣事以及經驗，各位看官，我們下期不見不散—— 夜已深，晚安，各位朋友，希望大家都可以在自己喜歡的行業裡邊發光發熱，祝願各位笑口常開，好彩自然來［心］