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血清使用小技巧 | 如何保證血清活性?解凍和儲存方法很重要
- 2022-03-11
什麼叫做血清
剛到貨的血清應該怎樣儲存?
血清到底要怎樣解凍才能保證活性?
血清在4℃冰箱能放多久?
作為一名細胞培養大戶,你是不是經常會糾結上面這些問題?畢竟血清這種金貴的東西,
可得好好珍惜
,一個不小心,就可能導致實驗失敗,免不了要被導師責備。
那這些問題到底應該怎樣解決?有沒有標準答案?身為一個資深的代理商,關於血清的
儲存和解凍
問題我們可是有好好研究過的。
如果你也存在同樣的疑惑,那就請接著往下看吧。
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常規儲存
首先,剛到貨的血清,趁著它還凍手,
趕緊放進-20℃冰箱中
,避免反覆凍融。當然,如果你的課題組不差錢,-80℃冰箱空間充足,把血清儲存進去也是沒有問題的。
穩了
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如何解凍
很多同學會說,不就是解凍血清嘛,這題我會!
放4℃過夜
emmm……怎麼說呢,直接在4℃冰箱裡過夜融化的方法,雖然很多人在這麼用,但還是有一些
潛在的風險
的。
我們都知道,在血清這種混合物中,
融化速度:蛋白質等幹物質>水這類溶劑
,所以蛋白質會率先溶解析出,而水還是結成冰的狀態,導致瓶子中間會出現一根透明的冰柱,而周圍則會呈現上黃下紅的分層渾濁液的狀態,在使用過程中很容易引起
沉澱、混合不均勻、區域性濃度過高
等問題,影響細胞生長。
更重要的一點是,血清中珍貴的生長因子等活性物質,它們在解凍過程中,有著與細胞復甦類似的經歷,都需要
快速解凍
才能最大程度地保留生物活性。顯然,4℃過夜這樣的長時間處理,很有可能會導致一部分「營養成分」的損失,影響細胞生長。
所以,為了更好地保留血清中的活性成分,使細胞培養更穩定,我們推薦使用
三步法溶解
,具體方法見下表,有需要的同學可以截圖儲存。
如果是儲存在-80℃的血清,則需
提前幾天先轉移至-20℃冰箱中
(至少24小時)
,再使用三步法溶解,避免溫差過大使血清失活。
注:此方法國際通用,適用於所有培養基,在水浴過程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身,使血清混勻,但搖動中儘量不要產生泡沫!
徹底解凍血清後,可以根據實驗需求,將其分裝,保證
每一份夠一次使用量
即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好後趕緊放回-20℃冰箱繼續儲存。需要配製培養基的時候,再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用
(最好能全部配成培養基,不要有剩餘)
,可以有效避免反覆凍融的問題
(遵循現用現配、現配現解凍的原則)
。配好的培養基可以放到4℃冰箱進行儲存。
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4℃存放時間
看到這裡,問題又來了,配好的培養基,或者剩下的那一點點血清,能在
4℃冰箱裡放多久
呢?
先給出我們認為比較合理的答案,再來解釋原因:
7
天
一般情況下,已經解凍的血清,無論是配成完全培養基還是在冰箱裡備用,
都不要超過一週
(7天)
,原因也很簡單,存放太久,生長因子等物質容易失活,而且比較容易受到汙染,影響實驗結果。
不知道今天這期內容有沒有解決大家的疑惑,無論是國產還是進口血清,都不算便宜,這麼貴巴巴的試劑,還請小心使用,讓它們的功效最大化,可不能讓銀子白花!
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