繼我們討論的滾瓶問題之後，本期我們將開始探討關於細胞培養箱的操作問題。

細胞的整個生命週期幾乎都是在培養箱中度過。理想情況下，培養箱能夠提供固定引數的溫度、溼度和氣體環境，為細胞生長提供持續而穩定的保障。然而現實情況中，培養箱內環境並非持續不變，可能出現微小差異。如果這些差異未被及時識別和消除，也會對細胞生長帶來負面作用。

接下來，我們將逐一討論培養箱各個引數對細胞培養的影響以及可以改進的方法。

01。溫度因素

如果培養箱絕熱效能差或門被持續開啟，內部溫度會下降。一般情況下，只有當培養皿或培養瓶中出現水蒸氣凝集時，操作者才會注意到上述問題。如果溫度下降，靠近門的培養容器中細胞生長速率變慢，甚至可能因水蒸氣凝集出現真菌汙染。

可以改進的方案為：對所有重要的實驗均使用單獨的細胞培養箱，減少培養皿或培養瓶取放的機率，使溫度波動最小化。如果沒有足夠多的培養箱，可將關鍵細胞放在溫度波動最小的區域內培養，比如培養箱最裡面的位置。

細胞培養箱中溫度細小變化造成的影響很難直接表現出來，不太容易被識別。圖1展現的是WI-38細胞一種獨特的生長形式，這種生長形式就是由培養皿中較小的溫度波動引起的。實驗人員將細胞接種於培養皿，並放置在培養箱內有孔洞的金屬架上，在細胞培養容器被放置入培養箱的最初幾個小時內，頻繁開啟培養箱，培養48個小時之後進行固定和染色，發現細胞形成了網格狀的生長形式。這是由於金屬支架比支架孔洞位置溫度稍高，細胞更傾向於在溫度高的區域生長。

圖1。人類成纖維細胞WI-38網格狀生長，差異形式與細胞培養中培養架上的孔洞相匹配

將細胞培養皿/培養瓶堆垛起來，也會造成培養皿或培養瓶之間的差異。堆垛最下方的培養皿/培養瓶與金屬支架直接接觸，升溫或降溫速率最快。堆垛中間位置相對不易受到溫度波動的影響。當進行需要評估細胞生長速率的實驗時，應該考慮到這些潛在的因素。建議：使用間隔裝置或者空的培養容器來避開與金屬支架的直接接觸，平放，不堆垛。